实时荧光定量PCR技术

       该技术的实验原理是将标记有荧光素的Taqman探针 ，或者在反应体系中加入过量的SYBR染料非特异性与模板DNA混合后 ，在一系列温度的变化作用下 ，荧光素游离于反应体系中 ，在特定光激发下发出荧光 ，随着循环次数的增加 ，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长 ，通过实时检测与之对应的随扩增而检测荧光信号强度 ，求得Ct值（即每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数） ，同时利用数个已知模板浓度的标准品或内参作对照 ，即可得出待测标本目的基因的拷贝数 。荧光定量PCR的优点在于其简便操作 、特异性以及对样本中目的基因进行定量 ，在分子生物学基础研究中广泛应用 。